诱导坏死

存活率和坏死概述

测定活性和坏死是药物和学术研究的重要组成部分。在收获的初级样本和组织培养的细胞中识别活细胞,使研究人员能够确定他们的样本的条件。此外,快速确定化合物对癌细胞的细胞毒性作用的能力使研究人员能够有效地识别潜在的候选药物,以便在药物发现管道中进一步开发。

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结核病和荧光

坏死最常以不可逆的细胞损伤为特征,包括但不限于:细胞质肿胀、永久性细胞膜损伤、细胞器破坏,并最终将细胞内容物释放到周围介质中。

在非活细胞中,细胞膜完整性的丧失使得膜排斥染料如碘化丙啶(PI)、溴化乙啶(EB)、7AAD、SYTOX绿/红等能够自由扩散到细胞中并与DNA结合。因为这些染料只进入细胞膜受损的细胞,所以早期凋亡和健康的细胞不会被染色,而死亡或垂死的细胞会被染色。发出的荧光信号被Cellometer捕获并生成图像。亮场和荧光图像都被Cellometer捕获并枚举。

使用Cellometer检测样品

Cellometer Vision检测细胞活力和坏死

Cellometer愿景,只加入20µl的样品到Cellometer计数室。样品的成像和分析在30秒内完成。可以查看明亮的视野和荧光细胞图像,以检查细胞形态和验证细胞计数。细胞总数,浓度和平均直径自动显示。

1.将20µl的样品移液到一次性载玻片中。

2.将幻灯片插入仪器

3.从下拉菜单中选择分析

4.点击计数,获取图像并查看细胞计数,浓度,直径

使用Cellometer Auto 2000检测细胞活力和坏死

1.吸管20µl 2。插入幻灯片3。选择“分析”并单击“计数”
4.结果在30秒!

温度诱导坏死

Jurkat细胞在不同温度下暴露20分钟,并用碘化丙啶染色。在37℃的标准培养温度下,细胞保持健康,很少检测到坏死细胞。样品的活力测定为93.8%。随着温度的升高,PI阳性细胞的比例从37℃时的6.2%上升到60℃时的89.8%。

Jurkat细胞图像

37°C 45°C 50°C 55°C 60°C
明视野 1237 1312 1099 1410 1097
π积极 79 169 176 623 983
生存能力 93.8% 87.2% 84.0% 55.8% 10.2%