干细胞

干细胞简介

使用原干细胞已成为领域,如癌症治疗,再生医学,移植和基本肿瘤学研究共同的地方。虽然它们被广泛使用,所产生的干细胞在实验室中的任何一种珍贵的商品。因为干细胞,是否间充质,胚胎或iPSC集,通常在下游实验检查表面标志物表达,细胞分化以及确定治疗潜力的初始接种密度,以及细胞样品尺寸使用,起着在使用这些细胞的重要作用。

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的自动细胞计数器Cellometer线结合在一个紧凑的和易于使用的仪器基于图像的细胞计数和荧光检测可靠地自动细胞计数,存活性测定和其他荧光测定法。通过简单地移取样品的20μL到一次性室,Cellometer获取被分析以确定细胞计数,浓度,细胞大小和荧光强度,典型地在30秒或更少的细胞图像,使得它们成为小体积样品的理想工具。类似地,20微升需要执行GFP trasduction /转染效率,细胞周期分析或任何其他基于细胞的测定法。

这些功能的结合使得它非常适合在干细胞研究中使用。样品可以被计数和活力使用明场Cellometer细胞计数器测定用台盼蓝。我们的荧光Cellometer细胞计数器和图像流式细胞仪系统与荧光检测相结合本明视场的功能,还确定使用荧光污渍如碘化丙锭干细胞活力,并能准确地确定在人类骨髓或脐带血的有核细胞的浓度。荧光成像模式也可用于转染的干细胞时,量化GFP转染效率。

干细胞的准确计数

分析在亮场模式下获得的细胞图像,以确定细胞总数。自动计算浓度,并自动保存或导出所有数据。这消除了用户对用户的可变性,提高了人工计数方法的吞吐量,特别是在分析可能是块状或不规则形状的干细胞时。

胚胎干细胞

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图1:Cellometer获得的胚胎干细胞(ES)图像。绿色圆圈表明已统计出的Cellometer软件细胞。

不规则&群集干细胞

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图2:细胞簇或不规则形状的细胞可以被准确计数。绿色圆圈表明已统计出的Cellometer软件细胞。

干细胞活性的自动确定

干细胞活力可以通过几种方法来确定。用台盼蓝染色的死细胞可以在明场模式(图3)进行分析。通过荧光染料,例如碘化丙啶(PI)检测存活力可以通过获取总细胞浓度和荧光图像的图像明计数PI染色的死亡细胞来进行。

人类骨髓间充质干细胞

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图3:人类的明分析图像间充质干细胞(HMSC)细胞显示绿色和台盼蓝圈活细胞染色死细胞红色圆圈。

小鼠胚胎饲养细胞

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图4。亮场图像为MEF细胞,荧光成像模式下可见PI染色的死亡细胞。

骨髓干细胞 - CD34 +

图1:Cellometer获得的胚胎干细胞(ES)图像。绿色圆圈表明已统计出的Cellometer软件细胞。

量化GFP转染效率

独特的明场/荧光成像能力还可以用于使用报告蛋白如GFP时,而不必使用复杂的方法,例如流式细胞术定量转染效率。总共计数在明视场模式下获取,并且GFP阳性细胞在荧光模式进行计数来计算的表达GFP的细胞的百分比。

转染小鼠胚胎饲养细胞

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图8:小鼠胚胎饲养(MEF)已经经过转染的细胞。总细胞数在明视场图像(左)确定的,GFP阳性细胞被荧光图像(右)在绿色圆圈表示。

干细胞在Cellometer上的分析结果

细胞类型 细胞浓度 电池检测/活力
CD + 34 4.81×106./ ml. PI活力:74.3%
小鼠胚胎饲养细胞(MEF) 5.18×105./ ml. AO或AO / PI
小鼠胚胎饲养细胞(MEF) 2.48×106./ ml. 台盼蓝活力:92.1%
小鼠胚胎饲养细胞(MEF) 1.06×106./ ml. PI活力:91.0%
转染小鼠胚胎喂养细胞(MEF) 总计:3.52×106./ ml.
GFP:8.24×105./ ml.
GFP.
人类骨髓间充质干细胞(HMSC) 6.49×106./ ml. 台盼蓝活力:91.4%
诱导多能干细胞(IPS) 7.51×105./ ml. 台盼蓝活力:37.9%
脐血 1.40×107./ ml. AO或AO / PI
人骨髓 7.32×107./ ml. AO或AO / PI
成体心脏干细胞 3.30×105./ ml. 台盼蓝活力:85.3%
人类胚胎干细胞 2.38 x 106./ ml. 没有任何
转染的人类胚胎干细胞(HES) 1.23x 106./ ml.
RFP: 8.32×105./ ml.
rfp.