荧光细胞计数
在含有GFP、RFP和非表达细胞的样品中测量% RFP阳性细胞
96孔板中含有不同%的RFP、GFP和非表达HeLa细胞,使用Celigo计数活细胞分析。采用亮场、绿色荧光通道和红色荧光通道。
步骤1。在Celigo图像细胞仪上获取和查看图像
查看完整的细胞图像

双击井图上的任意一口井,即可显示整口井的图像。放大以查看下面单元格图像示例中所示的细节。
D6井的亮场图像,放大视图

D6井的RFP荧光图像,放大视图

来自不同RFP+细胞群井的细胞图像示例
GFP + RFP +

招标书+

计算RFP +

GFP + RFP +

招标书+

计算RFP +

GFP + RFP +

招标书+

计算RFP +

步骤2。门和圈自动计数细胞
Celigo门控和分割接口

用Celigo图像处理软件识别的亮场、GFP+和RFP+细胞的叠加图。并给出了GFP与RFP强度散点图。当通过拖动来修改散点图上的栅格时,计算的单元格图像将自动更新。
示例图
GFP与RFP散点图

RFP强度直方图

GFP与RFP散点图

RFP强度直方图

GFP与RFP散点图

RFP强度直方图

步骤3。检查96孔板中每个孔的板水平结果
结果显示在一个基于板块的格式

步骤4。导出96孔板中每口井的结果并生成数据图
以Excel导出的结果

荧光蛋白表达百分比
