悬浮细胞计数

全良好的成像,用于准确计数非均匀细胞群

用于计数非均匀细胞种群的全井成像
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使用无标签的明亮场成像进行监测细胞生长并进行增殖的活细胞分析

明亮的田间图像显示细胞增殖

明亮的田间图像显示细胞增殖

在增殖测定期间,在第3天(右侧曲线)时,细胞数量从第0天至80621细胞增加到89323个细胞

监测细胞增殖随着时间的推移

监测细胞增殖随着时间的推移

在增加药物浓度下的总和Pi阳性悬浮细胞的活细胞分析

D2 D4 D8
BF. 87925. 57718 39107
pi(+) 2654 7520. 13171.
可行性 96% 87% 66%

PI阳性细胞数量以药物剂量依赖性方式增加

好吧D2

计数总和Pi阳性悬浮细胞 计数碘化丙啶酮

好吧D4

计数总和Pi阳性悬浮液2

好的D8

计数总和PI阳性悬浮细胞3 细胞计数碘化物3
CENIGO-CELL-COUNTING

用于CHO细胞的微观筛选平台的96孔基细胞计数测定

分析议定书

  • 使用光学质量96孔板
  • 使含有Hoechst 33342和碘化丙糖的主染料
  • 负载200μlMerain染料混合
  • 每孔加入3μlCho细胞悬浮液
  • 在室温下孵育40分钟
  • Image 96孔板在Celigo图像cytometer(蓝色和红色荧光通道)
  • 对Hoechst +和PI +单元格的“直接小区计数”图像分析参数
  • 计算每个井中的所有细胞
  • 使用Live Cell Count获得Live Cell密度:Hoechst + - Pi +
  • 获得生存能力:( hoechst + - pi +)/ hoechst +

使用Hoechst +和PI +细胞的图像分析进行直接小区计数

CHO细胞图像

直接小区计数CHO细胞图像

CHO单元格图像在蓝色通道,红色通道,合并图像和计数的单元格图像中。

实验1:

制备了稀释系列的指数增长的健康CHO-S细胞,并检查了健康CHO-S细胞VCD的活细胞密度(VCD),变异系数(CV)

基于96孔的Celigo法对一种基于一个样本的细胞计数方法的活细胞密度的比较。

可活细胞密度的比较

绘制可活细胞密度,以针对基于96孔和一种基于一种样品的方法的相对细胞浓度绘制。来自基于96孔的线性回归的虚线黑线(R2 = 0.999)

实验1:

制备了稀释系列的指数增长的健康CHO-S细胞,并检查了健康CHO-S细胞VCD的活细胞密度(VCD),变异系数(CV)

VCD使用96井Celigo方法对基于一个样本的小区计数方法的比较。

CV密度条图 - 基于样本的细胞计数方法

使用基于96孔和一种基于一个样品的方法,绘制VCD测量的变异系数符合测量的细胞浓度。

实验1:

制备了稀释系列的指数增长的健康CHO-S细胞,并检查了健康CHO-S细胞VCD的活细胞密度(VCD),变异系数(CV)

由于96孔基和单样本的样品中的细胞浓度而不会改变的可行性

百分比生存能力比较数据

使用Celigo 96孔基和基于一个基于一个样品的方法,绘制可活力百分比靶向测量的细胞浓度。

实验2:

用内质网(ER)应激诱导剂unicicamycin处理两种浓度的细胞,以产生具有较低天线的样品

一个样本与96井的存活率

基于96孔和一种基于一个样本的方法,可活力和VCD以剂量依赖性方式降低。

结论

基于96孔的方法与基于单样本的方法在VCD,VCD的CV和活性测量中显示出优异的相关性。基于所进行的细胞稀释系列,基于96孔的方法的计数范围为1×105.到1×107.活细胞/ ml。

引文:
Hansen HG,Nilsson CN,Lund Am,et.al.al.(2015)多功能微观筛选平台,用于提高中国仓鼠卵巢细胞中的重组蛋白质生产率。科学报告12(5):18016