转染/转导

Celigo细胞成像细胞仪上获得的转导成纤维细胞的益处

  1. 转染/转导培养物的快速全孔分析(1536孔至6孔)
  2. 快速确定高效转染和转导的最佳参数
  3. 使用实时成像确定瞬时和稳定的转染/转导率
  4. 许多不同粘附和非粘附细胞类型的可靠分析
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介绍

细胞转染和转导的优化包括选择方案,确定质粒/病毒的适当质量,以及评估转染/转导后的最佳时间,以获得所需构建物的最佳表达。使用荧光报告器和无损检测原位在Celigo细胞成像细胞仪上成像,通过在一段时间内重复成像一组孔或烧瓶,可以快速优化这些参数。准确的全井亮场细胞计数可生成标准化为绝对细胞数的基于细胞的数据。

GFP转染96孔板的优化

荧光蛋白

在96孔板中用HeLa细胞进行全孔观察GFP/RFP转染

在96孔板中观察转染GFP/RFP的HeLa细胞。

  • 识别亮场图像中的细胞
  • 测量绿色和红色通道中的荧光蛋白信号
  • 无标签、无创——无需胰蛋白酶化粘附细胞
  • 在提供时间数据的同一平板上,逐个细胞重复量化荧光蛋白信号
  • 在同一孔中添加碘化丙啶以检测GFP转染细胞的活力

成像和计数细胞

细胞图像叠加:亮场和绿色

(A) 细胞图像叠加:亮场和绿色,(B)Celigo图像处理软件使用亮场图像识别所有细胞,用红色轮廓表示。在这个红色轮廓内,测量绿色荧光强度以控制细胞群并产生转染效率。

在5天内监测转染率和存活率

用一系列浓度的编码turbo-GFP1的质粒转染HeLa细胞

用一系列浓度的编码turbo-GFP1的质粒转染HeLa细胞,并将其接种到96孔板中。为了监测细胞死亡,在一些实验中,向孔中加入碘化丙啶。5天内每天对同一平板进行成像。

使用单个96孔板优化具有多个时间点的贴壁HeLa细胞的瞬时转染。

Celigo细胞成像细胞仪上获得的转导成纤维细胞

活的全转化成纤维细胞

用绿色荧光蛋白慢病毒转导的人包皮成纤维细胞的全孔活体(12孔平板;左)和放大图像(右)。

用绿色荧光蛋白慢病毒转导的人包皮成纤维细胞的全孔活体(12孔平板;左)和放大图像(右)。

Celigo细胞成像细胞仪上转导成纤维细胞的分割

活体图像:转基因成纤维细胞的分割

使用表达式分析应用程序进行实时图像分割

使用表情分析应用程序对实时图像进行分割。细胞核被分割为掩膜(左),GFP阳性细胞核被分割为靶细胞(右),以确定转导效率。

Celigo细胞成像细胞仪的转导优化

转基因人包皮成纤维细胞的图像与分析

人包皮成纤维细胞的图像及图像分析

在Celigo细胞仪上采集和分析不同数量GFP慢病毒转导的人包皮成纤维细胞的图像和图像分析。