趋化性

使用Celigo进行transwell活体细胞趋化分析并进行量化

  1. 在微孔板中进行趋化性测定,成像并量化
  2. 自动直接计数和细胞迁移的量化
  3. 获得迁移细胞的高分辨率亮场和荧光图像
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通过直接细胞计数执行和量化transwell基础的趋化性

基于transwell的细胞直接计数趋化性

悬浮细胞位于插入物内部,通过多孔膜从底板向化学引诱剂移动。Celigo用于自动计数底板中迁移的细胞。

mcp介导趋化试验的成像和定量分析

协议

  1. 种子细胞插入孔过夜
  2. 在井底添加常规细胞培养基
  3. 在不同浓度下,将单核细胞趋化蛋白MCP (monocyte chemoattractant protein)加到孔底,孵育4小时
  4. 4小时后,取出transwell插入物并对迁移的THP-1细胞成像

剂量依赖性mcp介导的趋化作用图像

剂量依赖性mcp介导的趋化作用图像

每个单核细胞趋化蛋白(MCP)剂量的亮场图像被获取,并使用Celigo图像细胞仪自动量化。

蓝色轮廓表示直接计数的细胞迁移通过transwell插入到井底。

MCP处理THP-1细胞活力的测定

MCP处理THP-1细胞活力的测定

为确定不同浓度的MCP是否对THP-1细胞有负作用,采用碘化丙啶(PI)染色并成像。

以上是具有代表性的亮场和荧光图像显示PI阳性死亡细胞很少。

mcp处理THP-1细胞活力数据

mcp处理THP-1细胞活力数据

根据Celigo分析的数据,我们可以得出结论,MCP在任何浓度下对THP-1细胞都没有任何负面影响。

所有样本的获得平均数和标准差显示出最小的变异。