高级酵母分析

介绍

测量酵母的计数,浓度,活力和活力是最常见的测量。通过使用基于荧光的检测方法,较电流表视觉10X仪器还可以测量培养酵母样品的糖含量,中性脂质含量,海藻糖含量和GFP转染效率。

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高级荧光测定测量酵母生理参数

酵母活力分析使用CFDA-AM和碘化丙啶

用CFDA-AM(使用FOM VB-535-402)染色酿造酵母1小时,以测量酶活性酵母。孵育后,使用液晶计立即分析细胞以测量酶活性酵母的数量以确定样品的活力。可以确定在生产过程中积极发酵的酵母百分比,并用于优化发酵过程。将荧光线性门控设定为测量高CFDA-AM荧光的群体百分比。

使用Acriflavine荧光染色的酵母糖原含量

酵母糖原是一种大分子,为酵母甾醇和脂质合成提供所需的能量和碳水化合物,确保酵母在发酵过程中的代谢。糖原含量可通过吖啶黄染色测定(使用FOM VB-535-402),并在荧光直方图中分析单个细胞的荧光强度。糖原已被证明与活力相关,是需要监测的重要生理参数。

尼罗红荧光染色法测定酵母中性脂质含量

中性脂类是储存在酵母菌中的能量丰富的分子,不能被代谢。然而,它可以保护酵母细胞免受乙醇等有毒物质的侵害,从而延长其生存能力。为了测量中性脂质,可以用尼罗红染色(使用FOM VB-595-502),并在荧光直方图中分析单个细胞的荧光强度。采用荧光线性门控法测定高尼罗红荧光的种群百分比。

酵母海藻糖含量使用粗碱A-FITC荧光染色

海藻糖是一种糖二糖,其在细胞周期或细胞增殖期间提供能量。类似于中性脂质,海藻糖可以保护酵母细胞免受应力,高乙醇含量,热,脱水,氧化,pH变化。为了测量海藻糖含量,酵母细胞用粗碱素A-FITC(使用FOM VB-535-402)染色,并分析荧光直方图中单个细胞的荧光强度。还已知海藻糖可在发酵过程中提高存活能力。将荧光线性门控设定为测量高FITC荧光的群体百分比。

酵母绿荧光蛋白(GFP)转染

绿色荧光蛋白在酵母中的表达可以用Cellometer(使用FOM VB-535-402)来测量。首先对亮场图像进行分析,以计数所有细胞,并测量每个细胞内的荧光强度,并绘制成直方图进行分析。采用荧光线性门控法测定高GFP荧光的种群百分比。

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Celleter参考酵母分析

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