使用血型计计算哺乳动物细胞
介绍
血谱仪是血液学医生，医学从业者和生物学家超过一个世纪的重要工具。该装置最初被医生用于分析患者血液样本，这是创造血液学领域的初始火花。如今，血晶仪上计数的细胞类型已经扩展到藻类，酵母，癌细胞，干细胞，培养细胞，血基细胞，寄生虫，孢子等。虽然已经开发了各种自动化细胞计数仪器，但许多研究人员仍然倒回手动计数血谱仪。
用血晶计数计数手动单元格
步骤1.准备血型计
用70％EtOH清洁血型计和玻璃盖滑动。
步骤2.准备样品和负载
将玻璃盖板放在计数室上。
移液管10微升细胞样品进入血谱仪。
步骤3.手动计数样本中的单元格
将血型计放在显微镜下，典型放大倍数为100。
既集中在网格图案和细胞粒子上，并计算在4个大角色方块中发现的细胞总数。
如果电池触摸拐角广场的4个周边侧，则仅在2侧，2个外侧或2个内侧计数单元。
步骤4.细胞计算和血谱仪的处理
将稀释因子乘以细胞总数，通过计数的角正方形分割，并将其乘以104.获得细胞浓度（细胞/ mL）。
用70％EtOH清洁血术仪和玻璃盖滑动。
手动细胞可存活率测量血型计
使用台盼蓝测量哺乳动物细胞的活力
最早和最常见的测量细胞活力的方法之一是台盼蓝（TB）排除测定。台盼蓝是一种〜960道尔顿分子，即细胞膜不可渗透，因此仅进入具有受损膜的细胞。进入细胞后，Trypan Blue与细胞内蛋白质结合，从而使细胞成为蓝色。台盼蓝排除测定允许在给定人群中直接识别和枚举活（未染色）和死（蓝色）细胞。有关Trypan Blue活力分析的更多信息，请访问“使用台盼蓝和吖啶橙/碘化丙啶来测量细胞活力“ 网页。
台盼蓝获得协议
台盼蓝准备
第1步。用PBS稀释股票（0.4％）台盼蓝，达0.2％
第2步。用0.2微米过滤器过滤台盼蓝
血术计准备
第3步。用70％EtOH清洁血型仪和玻璃盖滑动
第四步。将玻璃盖板放在计数室上
细胞计数程序
第5步。涡旋靶细胞悬浮液和混合1：1，0.2％台盼蓝
第6步。移液管10微升细胞样品进入血型计
第7步。等待30秒的细胞定居
手动计数样本中的细胞
第8步。使用10倍或20倍的目标将血型计放置在显微镜下
第9步。既集中在网格图案和细胞粒子上，并计算在4个大角色方块中发现的细胞总数。如果电池触摸拐角广场的4个周边侧，则仅在2个外侧或2个内侧的2个外侧或2个内侧计算单元
第10步。计算活细胞（没有台盼蓝）和死细胞（带有台盼蓝）
细胞计算和清洁血谱仪
第11步。通过将稀释因子乘以细胞总数来获得细胞浓度（细胞/ ml），通过计数的角色正方形分开，并将其乘以104.。
第12步。清洁血术计和玻璃盖滑动，含70％EtOH
也可以使用Nexcelom一次性血谱仪进行类似的计数程序。