精液分析

精液分析简介

使用Cellometer Vision,一种基于荧光的细胞计数器,可以对多个精液样本进行成像和细胞浓缩和活力分析。活精液用SYBR 14染色,死精液用碘化丙啶(PI)染色。这一策略被用于测量各种物种的精液浓度和活力:熊、山羊、人类、海胆、狗、蜜蜂、驴和老鼠。

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细胞图像画廊

山羊精液浓度和活力的Cellometer Vision

方法

  1. 获得山羊精液样本
  2. 用PBS稀释精子
  3. 在PBS中准备稀释SYBR 14(分子探针)原液
  4. 将SYBR 14加入精子样本并孵育
  5. 将PI (Nexcelom, Cat# CS1-0109)添加到同一个SYBR 14染色的精子样本中并孵育
  6. 从培养箱中取出20µL染色的精子样品,用移液管移入细胞计计数室
  7. 待样品沉淀并将计数室插入测压仪视野中

山羊精液检测结果

亮场图像和合并计数F1/F2图像

在明亮的田野通道拍摄的山羊精液(左)。合并计数的F1(绿色- SYBR 14)和F2(红色- PI)图像(右)。用绿色标出的细胞是已计数的活有核细胞。用红色标出的是已死亡的有核细胞。

SYBR 14染色活细胞和PI染色死细胞

在明亮的田野通道拍摄的山羊精液(左)。合并计数的F1(绿色- SYBR 14)和F2(红色- PI)图像(右)。用绿色标出的细胞是已计数的活有核细胞。用红色标出的是已死亡的有核细胞。

结果表

Cellometer结果表显示细胞总数,活和死计数,浓度和平均直径。它还具有细胞存活率的百分比。

结论

使用SYBR 14和PI成功地测定了山羊精子的浓度和活力。