山羊精液浓度和活力的Cellometer Vision
方法
- 获得山羊精液样本
- 用PBS稀释精子
- 在PBS中准备稀释SYBR 14(分子探针)原液
- 将SYBR 14加入精子样本并孵育
- 将PI (Nexcelom, Cat# CS1-0109)添加到同一个SYBR 14染色的精子样本中并孵育
- 从培养箱中取出20µL染色的精子样品，用移液管移入细胞计计数室
- 待样品沉淀并将计数室插入测压仪视野中
山羊精液检测结果
亮场图像和合并计数F1/F2图像
在明亮的田野通道拍摄的山羊精液(左)。合并计数的F1(绿色- SYBR 14)和F2(红色- PI)图像(右)。用绿色标出的细胞是已计数的活有核细胞。用红色标出的是已死亡的有核细胞。
SYBR 14染色活细胞和PI染色死细胞
在明亮的田野通道拍摄的山羊精液(左)。合并计数的F1(绿色- SYBR 14)和F2(红色- PI)图像(右)。用绿色标出的细胞是已计数的活有核细胞。用红色标出的是已死亡的有核细胞。
结果表
Cellometer结果表显示细胞总数，活和死计数，浓度和平均直径。它还具有细胞存活率的百分比。
结论
使用SYBR 14和PI成功地测定了山羊精子的浓度和活力。