诱发坏死

活力和坏死概述

测量活力和坏死是药物和学术研究的重要组成部分。鉴定收获的主要样品和组织培养细胞中的活细胞提供了研究人员确定其样品的状况的能力。此外,快速确定化学化合物对癌细胞的细胞毒性作用的能力使研究人员能够有效地识别药物发现管道进一步发展的潜在药物候选者。

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TB对荧光

坏死最常具有不可逆转的细胞损伤,包括但不限于:细胞质溶胀,永久细胞膜损伤,细胞器分解,并且最终将细胞内容物释放到周围培养基中。

在非存活细胞的细胞膜完整性的损失允许膜排除染料如碘化丙啶(PI),溴化乙锭(EB),7AAD,SYTOX绿/红,和其他人自由地扩散到细胞并结合到其DNA。因为这些染料仅进入具有受损细胞膜的细胞,因此不会染色早期的凋亡和健康细胞,而死亡或染色细胞将被染色。发射的荧光信号被蓄电池仪捕获,并产生图像。BightField和荧光图像都被磁体计捕获并列举。

使用Cellometer进行样品检测

使用Cellorom Vision检测细胞活力和坏死

与之Cellometer Vision.,仅将20μl样品添加到Cellomomet计数室中。样品的成像和分析在不到30秒的时间内完成。可以观察明场和荧光细胞图像以检查细胞形态并验证细胞计数。自动显示总细胞计数,浓度和平均直径。

1.移液管20μl样品到一次性载玻片中。

2.将滑块插入仪器

3.从下拉菜单中选择“测定”

4.单击“计数”,获取图像和查看单元格计数,浓度,直径

使用Cellometer Auto 2000检测细胞活力和坏死

1.移液管20μl2.插入幻灯片3.选择测定&单击计数
4.结果30秒!

温度诱发坏死

将Jurkat细胞暴露于各种温度20分钟并用碘化丙啶染色。在37℃下,标准培养温度,细胞保持健康,并且检测到很少的坏死细胞。样品的可行性确定为93.8%。随着温度的增加,PI阳性细胞的百分比从60℃的37℃的6.2%增加至89.8%。

Jurkat细胞图像

37℃ 45℃ 50℃ 55℃ 60℃
明亮的领域 1237. 1312. 1099. 1410. 1097.
pi阳性 79. 169. 176. 623. 983.
可行性 93.8% 87.2% 84.0% 55.8% 10.2%