抗病毒药物发现、疫苗开发和发病机制研究的现代病毒学分析

在过去的几年中,Nexcelom生物科学公司与乐动体育-南安普顿合作伙伴政府机构、学术实验室和制药公司(如美国国家卫生研究院)等病毒学领域的领先实验室进行了合作疾病控制和预防中心(CDC)美国食品和药物管理局,国家卫生研究所/国家过敏和传染病研究所(NIH/NIAID)

这些实验室开发了利用平板成像仪提高灵敏度、效率和准确性的现代病毒学分析方法,从而减少了所用材料,缩短了回答关键问题的时间。

图像细胞检测加速病毒学研究

  • 在384孔板和96孔板上进行微中和试验,检测单感染细胞
  • 基于斑块,荧光灶和24孔和384孔板的自动化病毒感染/滴度测定
  • 在每块板5分钟内在24-和96孔中的斑块/焦点的形态定量
  • 电子商务50.&cc.50.用于抗病毒效力和同一种384孔板的细胞毒性
  • 以细胞为基础的抗体结合抑制试验在96孔板上进行~15分钟3 FL颜色
  • 自动无标签CPE使用亮场成像96孔板在不到5分钟

具有高通量单元计数器的更快应答

  • 24个样本在3分钟内检测PBMC、全血有核细胞计数和活力

加快临床前小鼠模型实验

小鼠和其他小动物模型中的免疫原性测试对于疫苗发育至关重要。在多个时间点的许多动物需要中和抗体滴度测量。对于每只小动物,血清的量有限。(典型的小鼠血液绘制小于200μl。)

加快临床前小鼠模型实验

Micro-Neutralization化验

在96孔,甚至384孔格式中,利用像the这样的图像细胞仪进行微量中和分析是非常有利的Celigo图像cytometer

细胞免疫分析

为了进行细胞免疫分析,需要获得活细胞计数。低活力的样品通常被排除在高维多色流式细胞术测量之外。

使用高速,高通量细胞计数器将提高样品处理速度,减少延迟时间和样品降解。

高通量高速电池计数器
虚拟或实验室演示

Cellaca MX高速,高吞吐量池计数器

加速感染性/病毒滴度/微生力和微观测量实验

在防治任何病原体的各个领域中,传染性都是一个关键的衡量指标。这包括抗病毒小分子筛选、单克隆抗体筛选、临床前动物模型、发病机制、途径发现和疫苗候选评估。

病毒量化涉及在特定体积中确定病毒颗粒的数量以获得病毒浓度。

传染性病毒浓度的测定采用两种不同的方法。

  1. 将连续稀释的病毒样品应用于健康的单层允许细胞,并枚举源自每轮感染的离散感染区域(斑块形成测定)
  2. 将连续稀释的病毒样本应用于健康的单层允许细胞,记录50%细胞被病毒杀死的病毒剂量(TCID50)

第一种方法病毒效价确定,传统的基于手动的视觉斑块计数测定是有意识地改善了减少测定扭转时间,减少了操作员引入的可变性,并提高了样品吞吐量。

Celigo Image Cytometer已经被用于在384、96、48、24、12和6孔板上自动进行基于计数的传染性检测。

  • 高含量,单感染细胞感染性试验
  • 基于免疫荧光的焦点形成测定
  • 基于酶标的免疫灶形成试验
  • 荧光伪病毒感染性测定
  • 传统的溶菌斑分析
病毒感染区

了解更多:

在病毒学研究、疫苗开发和基因治疗分析分析开发中使用Nexcelom图像细胞仪发表的论文

许多领先的病毒学实验室在他们的工作中使用了Celigo成像仪和其他Nexcelom图像细胞仪系统。下面是一些例子。

研究领域 病毒

发病机制-感染过程中病毒和人类细胞相互作用的动力学

鉴别病毒感染的细胞受体依赖性进入途径

" CD46促进了人类巨细胞病毒的进入和传播"
Stein,K.R.,Gardner,T.J.,Hernandez,R.E.et al。CD46促进人巨细胞病毒的进入和传播。Nat Commun10,2699(2019)。https://doi.org/10.1038/s41467-019-10587-1

人类巨细胞病毒(CMV)
鉴定对正链RNA病毒具有抗病毒活性的基因

“干扰素刺激基因的短发夹RNA筛网鉴定了细胞抗病毒反应的新型阴性调节剂”
Jianqing Li,Steve C. Ding,Hyelim Cho,Brian C. Chung,Michael Gale Jr.,Sumit K. Chanda,Michael S. Diamond
mBio june 2013, 4 (3) e00385-13;DOI:10.1128 / mbio.00385-13

西尼罗病毒
IL-6在病毒清除、免疫细胞应答、肺修复中的关键因子

“IL-6改善流感病毒感染的急性肺损伤”
杨敏,王超,杨森。et al。IL-6改善了流感病毒感染的急性肺损伤。Sci代表7,43829(2017)。https://doi.org/10.1038/srep43829

对人上皮细胞单细胞分辨率的流感病毒的先天免疫应答揭示了干扰素Lambda 1的邻静脉诱导
Irene Ramos, Gregory Smith, Frederique Ruf-Zamojski, Carles Martínez-Romero, Miguel Fribourg, Edwin A. Carbajal, Boris M. Hartmann, Venugopalan D. Nair, Nada Marjanovic, Paula L. Monteagudo, Veronica A. DeJesus, Tinaye Mutetwa, Michel Zamojski, Gene S. Tan, Ciriyam Jayaprakash, Elena Zaslavsky, Randy A. Albrecht, Stuart C. Sealfon,Adolfo García-Sastre, Ana Fernandez-Sesma
病毒学杂志2019年9月93日(20)e00559-19;DOI:10.1128 / JVI.00559-19

甲型流感病毒
不同的宿主组织在感染期间反应

“表征寨卡病毒感染对胎盘和小胶质细胞的不同影响”
马丁内斯Viedma议员;寨卡病毒感染对胎盘和小胶质细胞的不同影响。
病毒201810., 649年。

Zika病毒
研究控制粘膜部位抗病毒状态(AVS)的机制,以进行病毒防御

“IRF1保持抗病患者的最佳组成型表达并调节早期的抗病毒反应”
IRF1维持抗病毒基因的最佳组成表达,并调节早期抗病毒反应。
正面。免疫素。10:1019。doi: 10.3389 / fimmu.2019.01019

水疱性口炎病毒(VSV),流感病毒

疫苗开发和评价

开发一个新的疫苗平台

“流感病毒血凝素的疫苗平台使得表位特异性人巨细胞病毒抗体”能够产生“
Behzadi,硕士;斯坦,投资者;Bermudez-Gonzalez,贝拉;西蒙,诉;Nachbagauer r;一种基于流感病毒血凝素的疫苗平台能够生成抗原表位特异性的人类巨细胞病毒抗体。
疫苗20197., 51。

人类巨细胞病毒(CMV) e
用于人体外平台的微生物和微观测定,称为模拟物,以评估对疫苗候选者的免疫应答

一种呼吸道合胞病毒(RSV) F蛋白纳米颗粒疫苗将抗体反应集中于保守的中和域
Kurt A. Swanson, Jennifer N. Rainho-Tomko, Zachary P. Williams, Lilibeth Lanza, Michael Peredelchuk, Michael Kishko, Vincent Pavot, Judith Alamares-Sapuay, Haritha Adhikarla, Sankalp Gupta, Sudha Chivukula, Scott Gallichan, Linong Zhang, Nicholas Jackson, Heesik Yoon, Darin Edwards, Chih-Jen Wei, Gary J. Nabel
科学免疫学2020年5月01

呼吸合胞病毒(RSV)
疫苗开发的小鼠临床前免疫原性和疗效评价

纯化灭活寨卡疫苗候选疫苗可保护小鼠免受致命挑战
Baldwin,W.R.,Livengood,J.A.,Giebler,H.A.et al。纯化灭活寨卡疫苗候选对小鼠的致命挑战具有保护作用。
Sci代表8,16509(2018)。https://doi.org/10.1038/s41598-018-34735-7

Zika病毒
蛋白质疫苗候选评价

ns1疫苗引发的抗体可保护小鼠免受寨卡病毒感染
Mark J. Bailey,Felix Brocker,James Duehr,Fortuna Arumemi,Florian Krammer,Peter Palese,Gene S. Tan
mBio2019年4月,10(2)e02861-18;DOI:10.1128 / mBio.02861-18

Zika病毒

抗病毒药物筛选

鉴定可用于筛选具有抗病毒活性的现有药物药物的靶标或因子

“SARS-CoV-2蛋白相互作用图揭示了药物再利用的靶点”
Gordon, d.e., Jang, gm, bouhadou, M. et al.。SARS-CoV-2蛋白相互作用图揭示了药物再利用的靶点。
自然(2020).https://doi.org/10.1038/s41586-020-2286-9

“SARS-CoV-2抗病毒药物大规模药物重新定位调查”
生物奇2020.04.16.044016;doi: https://doi.org/10.1101/2020.04.16.044016

SARS-COV-2病毒

基因治疗,疫苗开发新方法

自动化和加速rAAV过程开发的空斑检测

“结合荧光检测和基于图像的自动计数提高斑块检测的速度、灵敏度和稳健性”
陈伟强,卢晓慧,陈伟强
https://doi.org/10.1016/j.omtm.2019.07.007
分子疗法:方法和临床发展2019年9月14日

1型单纯疱疹病毒
“使用图像细胞术研究MERS-COV抗体相互作用的高通量抑制测定” MERS-COV
开发一组工程记者流感病毒,用于使用384孔微小测定的中和抗体的深入分析
“综合性流感报告病毒模板,用于高通量深度分析的中和抗体”
Adrian Creanga,Rebecca A. Gillespie,Brian E.Fisher,Sarah F. Anderws,Liam Hatch,Tyler Stephens,Yaroslav Tsybovsky,Michelle C. Clank,Adrian B. McDermott,John R. Mascola,Barney S. Graham,Masaru Kanekiyo
生物奇2020.02.24.963611;doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.24.963611
流感荧光报告板
监测慢病毒载体诱导的基因沉默
“骨膜蛋白沉默对成骨瓶自噬的影响”
韩琴和军财
细胞重编程-128年6月的2019.122。http://doi.org/10.1089/cell.2018.0051
慢病毒载体