人间充质干细胞的有效长期冷冻保存是再生医学和组织工程应用的必要组分。cf欧洲杯竞猜
干细胞的处理是高度细腻的,并且适当的冷链存储代表了这些细胞疗法的运输和分布的关键组分.“用于再生医学的人脐带来源间充质基质细胞(UC-MSCs)的现货供应需要开发无毒、安全、高效的低温保存方案。”1
传统冷藏与自动超低温保存的比较
将细胞置于长期冷储存的过程需要重复的环境暴露。从极端寒冷到室温的波动的钟摆对细胞活性和功能产生了很大的影响。为了完全比较不同的保存流程,研究人员使用自动温控的冷冻保存系统来减少温度变化并调查与手动冷库方法的对比度。
采用UC-MSCs来研究模拟手动过程,通过液氮(-150℃)和室温之间的机器人臂重复转移。来自相同批次的UC-MSC也用自动冷冻保存系统加工,其中细胞在始终保持在150℃以下。
UC-MSCs的最佳条件
存活率、恢复百分率、粘附能力、细胞增殖和多系分化能力都被用来比较人工方法和自动冷冻保存系统处理UC-MSCs的能力。
UC-MSCs样本用吖啶橙(AO)和碘化丙啶(PI)活性染料混合染色,以评估细胞浓度、活力/存活率和回收率。UC-MSCs在每个细胞样本中测量3个重复Cellometer Auto 2000.确定折叠扩展的数量。
在广泛转移后,比较了传统手工样品处理和自动系统对UC-MSCs增殖的影响。Cellometer Auto 2000数字的最终细胞恢复比较结果显示,自动系统规避剧烈的温度波动,保留了适当的增殖能力。
解冻后UC-MSCs的粘附能力
当Celigo图像cytometer用于获得全孔BrightField图像并对整个96孔板进行汇合分析,以确定解冻后UC-MSC的粘附能力。

来自96孔板的全孔图像由Celigo图像细胞仪获得
Celigo通过评估0,50,100,200,300和400个循环的汇合评估了UC-MSCs的依从性,其中UC-MSCs覆盖的区域充满伪绿色。“随着循环编号的增加,手动系统管理的UC-MSCs的汇合逐渐从41.47%降低到14.29%,其中显着减少在200周期时开始。另一方面,自动系统管理的UC-MSC的汇合百分比持续持续为所有循环条件的〜42%。“1
自动冷冻保存系统表现出更高的活力,百分比回收,细胞增殖和改进的板粘附。这种优化整个冷链存储系统的可能性“提供了一种强大的工具,可以为UC-MSC的制造和银行开发安全,可靠,高效的协议,从而提高其对再生医学应用的现成可用性。”cf欧洲杯竞猜1
在干细胞研究、再生医学和组织相关工程中,温度调节的存储和运输是必要的组织步骤。了解细胞活动的机制在温度变化和特征的细胞是必要的,以找到最佳条件,必须适当的长期储存细胞疗法。
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参考:
- 闫虹徐,狮兆莹陈,等。,通过自动冷冻保存系统,低温学,2020年,ISSN 0011-2240尽量减少温度波动,优化UC-MSCS冷链储存的优化。https://doi.org/10.1016/j.cryobiol.2020.11.010.(http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/s0011224020306544.)
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