平板图像细胞术检测新型CD276-CAR NK-92介导的神经母细胞瘤肿瘤球毒性。

神经母细胞瘤冲击需要新的治疗方法

罕见神经母细胞瘤(NB)高危儿童患者复发频繁,副作用严重,死亡率高,需要新的治疗方法。许多因素限制了这一进步,包括成本效率问题、自体CAR产品的广泛工艺限制,以及制造可伸缩性问题。学习当前最先进的方法和技术,是突破这些障碍的唯一途径。

car -工程治疗神经母细胞瘤的靶点

近年来的研究表明,嵌合抗原受体修饰的免疫细胞可在血液系统恶性肿瘤中引发靶向CD19和CD22的特异性临床反应。I型人跨膜蛋白编码CD276-CAR NK-92,利用专门的car工程,可以直接靶向成神经细胞瘤。在这项研究中,研究人员“在单层培养和3D模型中生成了car -工程NK-92细胞,成功地消除了NB细胞系在体外通过靶向泛癌抗原CD276。”1

3D球状多细胞神经母细胞瘤

三维(3D)球体培养模型已被证明可以改善临床转译,因为与细胞单层培养系统相比,它具有更好的生理相关性。利用三维多细胞NB球形模拟三维肿瘤结构,极大地支持了研究CD276-CAR NK-92细胞瘤内细胞毒性的效果。

神经母细胞瘤球形细胞毒性快速测定

研究人员使用Celigo成像血细胞计数器以监测球体生长及综合荧光强度。接种gfp阳性NB细胞Nexcelom3 d96孔超低粘接圆底板.球形细胞培养72小时后,与CD276-CAR NK-92或天然NK-92细胞共孵育,以确定CAR信号是否能溶解NB细胞。在图中所示的时间点测量荧光图1超过96小时。CAR nk介导的细胞毒性通过Celigo指标计算NB球状体的平均综合荧光强度。

神经母细胞瘤球状体

图1 Celigo S Imaging Cytometer快速测量的神经母细胞瘤球形细胞的综合荧光强度

从方程式中去除CAR细胞的副作用

检测CAR - nk介导的细胞毒性是很重要的,因为CAR - T细胞会引起严重的副作用,包括细胞因子释放综合征(CRS)和“靶向、非肿瘤毒性”引起的神经毒性。这项研究显示了一种新的、更准确的、高度直接的高风险神经母细胞瘤治疗方案,其副作用可能更低。

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参考文献

陈志强,陈志强,陈志强,等。CD276作为神经母细胞瘤新的CAR - NK‐92治疗靶点。Adv细胞基因Ther.2020;00: e105。https://doi.org/10.1002/acg2.105