流感病毒感染呈现持续的挑战。

由于他们在人口中持续传播及其造成严重疾病和死亡能力,流感病毒具有重要的公共卫生重要性。流感的大型和多样化的自然储层亚型存在于野生鸟类中,引起了潜在的潜在,代表了对人畜共震的持续威胁。流感病毒也可以通过抗原转移或抗原漂移迅速变异,降低疫苗效果。这意味着抗病毒药物,例如M2阻滞剂,神经氨酸酶抑制剂和聚合酶酸性抑制剂,继续在流感感染的控制中发挥非常重要的作用。

测定对流感变异性的pimodivir功效

本研究,哈巴塔省疾病控制中心的研究人员试图建立一种方法,用于监测对Pimodivir的抗性的发育,聚合酶碱性蛋白(PB2)抑制剂在不同循环的流感中的病毒中。MDCK-SIAT1细胞用病毒感染并用连续稀释的Pimodivir(0.05-1000nm)处理,用于聚焦还原测定(FRA)或高含量的成像中和(提示)测定。在这两种情况下,用针对病毒核蛋白(NP)的抗体观察感染的细胞,然后与荧光团缀合的二抗孵育。Hoechst用于可视化核,并提供准确的总细胞计数和高通量成像器,例如Celigo,用于量化受感染的细胞群。通过曲线拟合分析自动计算pimodivir 50%抑制浓度(IC 50)值。

准确可靠地定量病毒感染

当筛选新的药物和获取药物对病毒的有效性时,自动化的高通量成像Celigo形象血细胞计数器与其他方法相比,在速度、准确性和成本方面具有显著优势。该仪器在15分钟内扫描每个培养皿的整个孔,并直接枚举感染细胞,用针对病毒蛋白质的荧光抗体标记,或直接表达荧光蛋白,给出传染性病毒滴度的绝对测量。总细胞数可以通过DAPI或Hoechst核染色,或通过brightfield直接计数来确定(图1)。

代表性病毒滴度实验

图1:代表性病毒滴度实验。在亮野中计数总细胞,病毒感染的细胞(GFP +)在绿色通道中量化。Celigo软件可以通过比较在绿色通道中计数的BrightField与细胞中的总细胞来计算感染细胞的百分比。

Celigo作为病毒学研究的宝贵工具

Celigo的能力超出了总未感染与受感染细胞的量化。病毒学中的其他常规测定,例如斑块/焦点,细胞病变,和微观测量通过软件提供快速和一致的数据输出,可以在仪器上进行分析(图2)。

病毒学中的其他分析

图2.病毒学中的其他测定。Celigo可以迅速量化色素斑块(顶部面板)或感染细胞的形态变化(细胞病变效应,底部面板)。

Celigo也可以与我们的联系Nexcelom堆垛机或其他第三方自动化平台大大扩大吞吐量并提供真正的行走自动化(图3)。

用于比色病灶测定的自动化工作流程

图3:Celigo上比色聚焦分析的自动化工作流示例。

Celigo是一个强大的平台,完全自动化和现代化传统病毒学测定。F-THETA镜头技术提供高吞吐量,整个井表面的质量图像证明非常适合病毒学测定,在其他基于细胞的测定中.易于使用的软件与先进的图像分析算法提供定量的数据,在图像采集期间,可以执行在一键。最后,与我们的Nexcelom堆垛机连接,为需要扫描多个板的项目提供超高的吞吐量。今天联系我们获取更多信息或演示!