什么是基因治疗?

不同细胞的遗传信息差异很大,基因表达的突变会破坏正常的细胞功能,导致细胞死亡或异常增殖,从而导致各种临床疾病。第一个分子生物学技术是在20世纪70年代发展起来的,用于理解基因表达、调控和细胞周期。随着近年来技术的发展,基因疗法已经被用来研究基因表达对致病细胞功能的负面或不存在的影响。基因治疗目前主要利用三种方法来修饰某些基因的内在表达来治疗疾病:

  1. 替换具有功能变体的缺陷基因
  2. 灭活或者抑制突变基因以防止进一步的损害
  3. 介绍一种增强靶向基因表达的新基因

在开发基于基因治疗的基于细胞的测定时,需要考虑哪些关键点?

许多因素和考虑必须得到优化,以发展适当的基于细胞的基因治疗分析。例如,基于动力学的分析可以确定传递新基因表达的适当时间,并测量随时间的影响。此外,应选择合适的靶细胞和检测条件来优化检测。最后,应进行关键调查,筛查患者样本中存在的中和抗体(nAbs),以确保适当的治疗结果。

图像细胞分析法可以节省时间,提高基因治疗开发效率

利用图像流式细胞术进行的细胞分析支持基因治疗研究从发现到发展。Nexcelom的图像细胞计数仪和自动细胞计数系统支持基于病毒载体的基因治疗研究和开发的三个重要方面。

  • 捕获和分析尖端和荧光图像的各种基于细胞的测定,从计数到转导效率检测到细胞毒性测定
  • 进行快速的细胞计数,准确地评估靶细胞培养的细胞增殖和活力
  • 对患者样本进行高通量筛查,以检测预先存在的中和抗体

图像细胞技术如何支持基因治疗的发展?

对于基因治疗研发,需要许多基于细胞的测定,要求优化宿主细胞质量,数量,活力,通道数和细胞制备程序,以确保一致且可比的结果。图像细胞术系统可以优化这些条件以获得一致的靶细胞制备,确定最佳AAV载体的测定,以及用于中和抗体的筛选。

  1. 高质量细胞培养开发的质量控制
    • 快速细胞计数
    • 准确评估增殖和生存能力
    • 细胞培养条件优化
    • 轻松克隆、选择和验证
  2. 选择并微调合适的AAV矢量
    • 同时评估转导效率和表达水平
  3. 开发筛选测定以鉴定患者预先存在的抗体
    • 筛查患者的媒介中和抗体
    • 基于细胞的在体外中和化验

示例:全井成像使得能够识别非均匀的细胞播种

显示细胞汇合的整个井图像

显示每个孔的细胞汇合的全板图。细胞播种均匀性可以在板内的不同位置变化。

这些整片图像的例子,采取了Celigo形象血细胞计数器,用伪绿色表示细胞汇合度,并在各孔之间显示出明显的无标记汇合度测量变化。了解细胞生长动力学和板内差异有助于研究人员提高数据的可靠性和尽量减少实验中的可变性。这些图像强调了对整个平板的每个井中的每个细胞进行整体成像的重要性,因为这影响数据和整体结果的质量。

图像细胞仪技术节省了有价值的时间和资源,其能够同时计数细胞总数,同时自动确定表达靶向抗体或荧光蛋白标记的受体的细胞数量,用于临界基因疗法。图像细胞仪为细胞计数,活力,凋亡数据,增殖,细胞毒性,测量转导效率和基因表达水平提供快速筛查和监测溶液,以提高从初始细胞系选择到最终产品质量控制的治疗发育的有效性。

来自Nexcelom Bioscience的图像细胞术系统为细胞计乐动体育-南安普顿合作伙伴数提供了用户友好的解决方案,以及支持研究人员的专注于开发新的基因疗法的其他生物现象。请访问基因治疗部分,了解更多关于图像细胞计数技术如何支持您的研究和开发。